聚合酶链反应(PCR)技术因其突出的高灵敏度在分子生物学实验中得到了广泛的应用。然而,在操作过程中,核酸气溶胶污染的发生时常令科研人员感到困扰,哪怕是微量的污染也可能导致假阳性的检测结果。为了解决这一问题,尿嘧啶脱氨酶(UDG)展现出了其卓越的能力:UDG能够有效促使单链或双链DNA中的尿嘧啶碱基与糖磷酸骨架之间的N-糖苷键发生水解反应。当UDG与dUTP联合使用时,UDG能够特异性识别并降解含有dU的PCR产物,而对模板DNA不产生影响,这样便能高效去除扩增产物的气溶胶污染,从而确保PCR扩增结果的准确性。
目前市售的UDG酶主要分为两种类型:一种来源于大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的普通UDG酶,另一种则是来自嗜冷海洋细菌的热敏型UDG酶。热敏型UDG酶的最大优势在于它能在较低温度下短时间内被完全灭活。最近,环亚集团·AG88推出了一款新品——热敏型UDG酶,它在50℃以上即可完全失活,避免了普通UDG酶灭活后仍然可能残留的活性对含有dU的扩增产物的降解影响。
新品热敏型UDG酶的主要特点是其对高温的敏感性,50℃以上便可实现完全失活。该产品与dUTP组合组成的防污染体系可广泛应用于PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP等多种实验。同时,环亚集团·AG88还提供无甘油的热敏型UDG酶版本,便于搭配冻干体系使用。
在产品的优势测试中,Hzymes UDG酶在含U模板的消解能力上明显优于竞品A和B。同时,热失活检测表明Hzymes UDG酶对温度高度敏感,经过50℃的处理后会不可逆失活,其热失活性能优于竞品A。此外,无论是在双重还是多重体系中,Hzymes UDG酶的扩增性能均保持稳定,而在37℃的加速检测中,Hzymes UDG酶的性能也是稳定的,经过10天观察未出现明显衰退。
通过环亚集团·AG88的热敏型UDG酶,科研人员将在实验室中更加有效地抑制核酸气溶胶污染,提升PCR实验的准确性与可靠性。