本试剂盒仅限于科学研究，严禁用于医学诊断检测。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）进行检测。具体操作步骤如下：

检测原理

将样本、标准品和HRP标记的检测抗体依次添加到已预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，经过适当的温育和洗涤后，使用底物TMB显色。在过氧化物酶的催化下，TMB转化为蓝色，随后在酸性环境下转变为最终的黄色。显色的深度与样品中的adropin（AD）浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测量吸光度（OD值），从而计算样品浓度。

试剂盒组成

本试剂盒分为96孔和48孔两种配置，具体组成如下：

• 微孔酶标板：96孔配置（12孔×8条），48孔配置（12孔×4条）
• 标准品：03mL*6管（无）
• 样本稀释液：6mL（96孔），3mL（48孔）
• 检测抗体-HRP：10mL（96孔），5mL（48孔）
• 20×洗涤缓冲液：25mL（96孔），15mL（48孔）
• 底物A：6mL（96孔），3mL（48孔）
• 底物B：6mL（96孔），3mL（48孔）
• 终止液：6mL（96孔），3mL（48孔）
• 封板膜：2张（全部配置）
• 说明书：1份（全部配置）
• 自封袋：1个（全部配置）

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用无热原和内毒素的试管，操作时避免细胞刺激。收集血液后，3000转离心10分钟，将血清与红细胞分离。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水进行捣碎，3000转离心10分钟后取上清。

5. 保存：如样本在收集后不及时检测，应按一次用量分装并冻存于-20℃，避免反复冻融，解冻时确保样品均匀充分解冻。

自备物品

1. 酶标仪 (450nm)

2. 高精度加样器及枪头 (05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL)

操作步骤与注意事项

1. 从冷藏环境取出的试剂盒应在室温下平衡15-30分钟后使用，开封后的板条请放入密封袋中保存。

2. 洗涤液可能析出结晶，稀释时可加热溶解，洗涤过程不会影响结果。

3. 各步骤加样应使用加样器，并定期校对其准确性，确保实验结果的可靠性。加样时间最好控制在5分钟以内，样本较多时可使用排枪。

4. 每次测定时应同时制作标准曲线，并建议做复孔。若样本中待测物质含量极高（样本OD值超过标准品第一孔的OD值），应先用样品稀释液进行稀释并计算总稀释倍数。

5. 封板膜仅限一次性使用，以避免交叉污染。

6. 请严格按照说明书操作，结果判定以酶标仪读数为准。

7. 底物应避光保存。

8. 所有样品、洗涤液及废弃物应按传染危险品处理。

9. 不同批次的试剂组件不得混用。

温馨提示：本公司提供代测服务，凡购买环亚集团·AG88的ELISA试剂盒均可享受免费代测服务，详情请咨询销售经理或在线客服。